نوع مقاله : بیماری‌شناسی گیاهی

نویسندگان

• شیرین فرزادفر ¹
• رضا پوررحیم ¹
• مژده ملکی ²

¹ بخش تحقیقات ویروس‌شناسی گیاهی، موسسه تحقیقات گیاهپزشکی کشور، تهران

² دانشگاه آزاد اسلامی، واحد ورامین- پیشوا، دانشکده کشاورزی، گروه گیاهپزشکی، تهران

چکیده

طی دو سال 91-1390، مجموعاً 932 نمونه برگی یونجه با علائم زردی، قرمز شدن برگ‌ها، نکروز و کم‌رشدی از دو استان لرستان و ایلام جمع‌آوری گردید. بر اساس آزمون سرولوژیکی لکه‌گذاری بافتی و بکارگیری پادتن تک همسانه‌ای 5G4 (اختصاصی علیه لوتئوویروس‌ها) 35 درصد نمونه های تصادفی دارای واکنش مثبت بودند. آنالیز مولکولی نشان دهنده آلودگی این نمونه‌ها به ویروس زردی غربی چغندرقند (BWYV) از جنس پولروویروس بود. نموده‌سازی بیولوژیکی با تلقیح بوته‌های سالم توسط شته سبز هلو، منجر به تولید علائم رگبرگ روشنی در رقم IC1 چغندرقند، زردی رگبرگ در کلزا رقم Otsubu، زردی رگبرگ و کم‌رشدی در خردل سفید و نیز زردی رگبرگ شدید در یونجه همدانی گردید. ناحیه ژن پروتئین پوششی (CP) با آغازگرهای اختصاصی تکثیر و منجر به تولید قطعه مورد نظر به طول حدود 560 جفت‌باز گردید. نتایج حاصل از تعیین نقشة تحدید قطعات به کمک آنزیم‌برشی Sma I تایید کننده آلودگی نمونه‌ها با BWYV بود. آنالیز توالی‌ها، نشان دهنده وجود 6/98 تا 4/99 درصد شباهت نوکلئوتیدی در بین جدایه‌های ایرانی بود. کمترین و بیشترین شباهت به ترتیب 5/92 و 97 درصد با جدایه ایتالیایی (L40020) و جدایه فرانسوی FL1 (X13063) تعیین گردید. بر اساس درخت تبارزایی بروش NJ جدایه‌های ایرانی BWYV به دو زیر گروه تقسیم شدند. این اولین گزارش از آلودگی مزارع یونجه با BWYV و تعیین توالی ژن CP جدایه­های یونجه آن در ایران می‌باشد

کلیدواژه‌ها

• ویروس زردی غربی چغندرقند
• یونجه
• سرولوژی
• رونوشت برداری برگردان- واکنش زنجیره‌ای پلی‌مراز

عنوان مقاله [English]

Incidence of Beet western yellows virus (BWYV) in alfalfa fields of Lorestan and Ilam provinces (West Iran) and its taxonomical place using coat protein gene

نویسندگان [English]

• Shirin Farzadfar ¹
• Reza Pourrahim ¹
• Mozhdeh Maleki ²

چکیده [English]

During 2011 and 2012, a total of 932 alfalfa leaf samples with yellows, reddening, necrosis and stunting were collected from Lorestan and Ilam provinces. Samples were tested by tissue blot immuno assay (TBIA) using 5G4 monoclonal antibody (a broad spectrum antibody against wide range of legume infecting luteoviruses) in which 35% of random leaf samples showed positive reaction. Molecular analysis confirmed the infection of samples by Beet western yellows virus-BWYV (Polerovirus genus). Inoculation tests using green peach aphids (Myzus persicae) induced vein clearing in sugar beet cv. IC1, vein yellowing in canola (cultivar Otsubu), stunting in white mustard and severe vein yellowing in alfalfa cv. Hamedani. A DNA fragment with the expected length of 560 bp corresponding to BWYV coat protein (CP) gene was amplified. PCR-RFLP analysis using Sma I also revealed BWYV specific profile for the studied isolates. The identity of BWYV-CP gene was 98.6 to 99.4 %.among the Iranian isolates at nt levels The lowest and highest sequence identities were 92.5 % and 97 % with isolates from Italy (L40020) and FL1 (X13063) from France, respectively. Phylogenetic tree using NJ method showed that Iranian BWYV isolates clustered into two subgroups. This is the first report of BWYV occurrence in alfalfa fields in Iran and their CP nucleotide sequences.

کلیدواژه‌ها [English]

• Beet western yellows virus
• Alfalfa (Medicago sativa)
• Serology
• RT-PCR